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液相色譜儀測(cè)定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉方法

2019-06-21 16:53:16來(lái)源:admin

一、檢測(cè)方法:

依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn):食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定(GB 5009.28-2016)。

二、客戶要求:

食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定。

三、 方法原理

樣品經(jīng)水提取,高脂肪樣品經(jīng)正己烷脫脂、高蛋白樣品經(jīng)蛋白沉淀劑沉淀蛋白,

采用液相色譜分離、紫外檢測(cè)器檢測(cè),外標(biāo)法定量。

                                   

四、 試劑和材料

4. 1 試劑

4. 1. 1 氨水(NH 3 ·H 2 O)

4. 1. 2 亞鐵氰化鉀[K 4 Fe(CN) 6 ·3H 2 O]

4. 1. 3 乙酸鋅 [Zn(CH 3 COO) 2 ·2H 2 O]

4. 1. 4 無(wú)水乙醇(CH 3 CH 2 OH)。

4. 1. 5 正己烷(C 6 H 14 )。

4. 1. 6 甲醇(CH 3 OH):色譜純。

4. 1. 7 乙酸銨(CH 3 COONH 4 ):色譜純。

4. 1. 8 甲酸(HCOOH):色譜純。

4. 1. 9 苯甲酸鈉 (C 6 H 5 COONa,CAS 號(hào):532-32-1),純度≥99.0%;或苯甲酸

(C 6 H 5 COOH,CAS 號(hào):65-85-0),純度≥99.0%,或經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證

書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

4. 1. 10 山梨酸鉀 (C 6 H 7 KO 2 ,CAS 號(hào):590-00-1),純度≥99.0%;或山梨酸

(C 6 H 8 O 2 ,CAS 號(hào):110-44-1),純度≥99.0%,或經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書

的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

4. 1. 11 糖精鈉 (C 6 H 4 CONNaSO 2 ,CAS 號(hào):128-44-9),純度≥99%,或經(jīng)國(guó)家

認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

4. 2 試劑配制

4. 2. 1 氨水溶液(1+99):取氨水 1mL,加到 99 mL 水中,混勻。

4. 2. 2 亞鐵氰化鉀溶液(92 g/L):稱取 106 g 亞鐵氰化鉀,加入適量水溶解,

用水定容至 1000 mL。

4. 2. 3 乙酸鋅溶液 (183 g/L):稱取 220 g 乙酸鋅溶于少量水中,加入 30 mL

冰乙酸,用水定容 1000 mL。

4. 2. 4 乙酸銨溶液(20 mmol/L):稱取 1.54 g 乙酸銨,加入適量水溶解,用水

定容至 1000 mL,經(jīng) 0.22 μm 水相微孔濾膜過(guò)濾后備用。

4. 2. 5 甲酸-乙酸銨溶液(2mmol/L 甲酸+20mmol/L 乙酸銨):稱取 1.54 g 乙酸

銨,加入適量水溶解,再加入 75.2 μL 甲酸,用水定容至 1000 mL,經(jīng) 0.22μm

水相微孔濾膜過(guò)濾后備用。

4. 3 材料與儀器

4. 3. 1 高效液相色譜儀:譜析 LC-3000 高效液相色譜儀,配備 px-17 在線

脫氣機(jī)、LC-3000 二元高壓輸液泵、LC-3000 自動(dòng)進(jìn)樣器、LC-3000 柱溫箱、LC-3000

雙波長(zhǎng)-紫外檢測(cè)器。

4. 3. 2 色譜柱:①C 18 柱,4.60 mm * 250 mm,粒徑為 5.0 μm。

②RP-AQUA 柱,,4.60 mm * 250 mm,粒徑為 5.0 μm。

4. 3. 3 分析天平:感量為 0.001g 和 0.0001g。

4. 3. 4 渦旋振蕩器。

4. 3. 5 離心機(jī):轉(zhuǎn)速>8000 r/min。

4. 3. 6 勻漿機(jī)。

4. 3. 7 針頭過(guò)濾器:0.22 μm 有機(jī)濾膜。

4. 3. 8 抽濾瓶。

4. 3. 9 真空泵。

4. 3. 10 微孔濾膜 0.22 μm。

4. 3. 11 恒溫水浴鍋。

4. 3. 12 超聲波發(fā)生器。

4. 3. 13 塑料離心管:50 mL。

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