色譜分析通常首先得定性分析，最終是定量分析，所以定性分析是非常重要且不可忽視的。定性分析一般是用色譜峰保留時(shí)間來(lái)體現(xiàn)的，這就對(duì)色譜峰保留時(shí)間有了要求，保留時(shí)間得穩(wěn)定，不能有大的變化，否則定性分析可能就會(huì)出錯(cuò)或影響定量分析（色譜峰寬、峰高、峰面積與保留時(shí)間有一定關(guān)系，一般保留時(shí)間短色譜峰寬小，峰高高，峰面積偏小；保留時(shí)間長(zhǎng)色譜峰寬大，峰高低，峰面積偏大）。

實(shí)驗(yàn)員在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中經(jīng)常會(huì)碰到色譜峰前移或后移的現(xiàn)象（色譜峰保留時(shí)間逐漸變短說(shuō)明色譜峰前移，色譜峰保留時(shí)間逐漸變長(zhǎng)說(shuō)明色譜峰后移），有時(shí)會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生不小的影響。下面我們就以高效液相色譜為例簡(jiǎn)單介紹介紹這一類(lèi)問(wèn)題發(fā)生的原因及應(yīng)對(duì)辦法。

色譜講究的是分離，保留時(shí)間長(zhǎng)短主要也是由色譜分離決定的。影響色譜分離的因素主要有色譜柱、流動(dòng)相、流速、色譜柱溫度等。

溫度影響色譜柱分離時(shí)間，一般色譜柱溫度越高色譜分離越快，保留時(shí)間越短，反之相反。如果早上上班實(shí)驗(yàn)室溫度較低，開(kāi)啟加熱設(shè)備開(kāi)始工作，實(shí)驗(yàn)室溫度逐漸升高，如果在這期間實(shí)驗(yàn)，色譜峰保留時(shí)間會(huì)越來(lái)越短。如果上班實(shí)驗(yàn)室溫度較高，開(kāi)啟制冷設(shè)備開(kāi)始工作，實(shí)驗(yàn)室溫度逐漸降低，如果在這期間實(shí)驗(yàn)，色譜峰保留時(shí)間會(huì)越來(lái)越長(zhǎng)。所以實(shí)驗(yàn)時(shí)實(shí)驗(yàn)室溫度一定得穩(wěn)定，不能有大的變化或波動(dòng)，避免空調(diào)等控溫設(shè)備正對(duì)著液相色譜儀或近距離吹風(fēng)。另外系統(tǒng)中加一個(gè)可能的柱溫箱也是很好的選擇。

流速影響。在允許范圍內(nèi)流速越大色譜分離越快。儀器開(kāi)啟后液相泵要大流速?zèng)_洗（廢液從放空閥排走），以便泵流速快速達(dá)到正常。一般由于實(shí)驗(yàn)室溫度、流動(dòng)相中氣泡、液相泵內(nèi)之前的流動(dòng)相等影響，液相泵開(kāi)啟后流速偏低而后緩慢升高，如果流速?zèng)]平衡好就開(kāi)始實(shí)驗(yàn)，色譜峰保留時(shí)間越來(lái)越短。大家都知道流動(dòng)相中氣泡多會(huì)影響液相泵流速。有的液相色譜儀沒(méi)配在線脫氣機(jī)，脫氣靠超聲波振動(dòng)儀，這樣的話(huà)剛振動(dòng)脫完氣的流動(dòng)相中氣泡較少，液相泵流速不受影響，但時(shí)間一長(zhǎng)，空氣中的氣體又會(huì)溶解到流動(dòng)相中，流動(dòng)相中氣泡又會(huì)多，泵流速又會(huì)降低，色譜峰保留時(shí)間又會(huì)變長(zhǎng)。流速是色譜條件的重要組成部分，所以液相泵流速一定要控制好，最好配上在線脫氣機(jī)。

流動(dòng)相成分影響。大家都知道對(duì)于反相色譜，流動(dòng)相中有機(jī)相成分含量越高色譜峰保留時(shí)間越短，反之越長(zhǎng)。這個(gè)配好的流動(dòng)相正常情況下對(duì)色譜峰保留時(shí)間是沒(méi)有影響的，但有一種情況有影響。流動(dòng)相中有機(jī)相成分很多時(shí)候是會(huì)揮發(fā)的，尤其是流動(dòng)相不多的時(shí)候相對(duì)揮發(fā)的會(huì)更快，這個(gè)時(shí)候流動(dòng)相中有機(jī)相成分比例下降，實(shí)驗(yàn)時(shí)色譜峰保留時(shí)間會(huì)越來(lái)越長(zhǎng)。所以實(shí)驗(yàn)時(shí)流動(dòng)相不多了有時(shí)也會(huì)影響色譜峰保留時(shí)間，如果對(duì)實(shí)驗(yàn)要求較高，建議這時(shí)添加流動(dòng)相或停止實(shí)驗(yàn)。有人這時(shí)可能會(huì)問(wèn)多少算多，多少算不多，個(gè)人建議100ml為界 ，100ml以?xún)?nèi)算不多。

色譜柱影響。色譜柱柱效下降，分離效率也就下降了，色譜峰保留時(shí)間也就越來(lái)越長(zhǎng)了。那什么會(huì)影響色譜柱柱效呢？第一色譜柱長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)使用柱效會(huì)下降；第二單次實(shí)驗(yàn)后對(duì)色譜柱洗脫時(shí)間不夠或洗脫的不充分，色譜柱柱效會(huì)慢慢下降；第三色譜柱受污染柱效會(huì)下降；第四色譜柱也有壽命，使用的時(shí)間長(zhǎng)了色譜柱離報(bào)廢的時(shí)間就會(huì)越來(lái)越短，柱效也就會(huì)越來(lái)越低，色譜峰保留時(shí)間就會(huì)越來(lái)越長(zhǎng)。這個(gè)使用時(shí)就得多注意了，尤其色譜柱，維護(hù)的好了用的效果也好壽命也長(zhǎng)，維護(hù)不好用不幾次可能就報(bào)廢了。

色譜峰前移或后移影響實(shí)驗(yàn)效果，以上總結(jié)了四方面影響色譜峰前移或后移的原因及解決辦法，供廣大實(shí)驗(yàn)室同胞們參考討論。